检验科医用显微镜对样品确实存在特殊要求,这些要求主要围绕确保成像质量、提高检测准确性而设计。以下从样品特性、制备规范到临床应用,为您详细解析:
一、核心样品要求
1. 清洁度
标准:样品表面需无油脂、污渍或杂质,确保光线穿透性。
案例:骨髓涂片检测前需用甲醇固定并去除纤维蛋白,避免干扰白细胞观察。
2. 透明度
标准:需观察内部结构的样品(如组织切片)需保证透明度。
处理技术:
不透明样品:通过染色(如HE染色)、镀膜或超薄切片(厚度<1μm)处理。
特殊场景:尿液结晶分析需离心后取沉淀物,避免浑浊液体影响成像。
3. 尺寸与形状
适配原则:样品需与载物台及视场匹配,通常要求:
直径:<50mm(如组织切片需贴合载玻片尺寸)。
厚度:切片样品<5μm,三维物体需<15mm高度。
4. 表面处理
平整度:需抛光或打磨至镜面效果(如金属疲劳裂纹检测)。
反射增强:陶瓷样品可镀金膜提升对比度。
二、不同检验项目的特殊需求
检验项目 | 样品要求 | 制备技术 |
血液学 | 新鲜血液需EDTA抗凝,推片角度控制(25°-35°) | 瑞氏-吉姆萨染色,细胞形态学分析 |
微生物学 | 痰标本需液化处理,脓液需涂片干燥固定 | 革兰氏染色或抗酸染色,油镜观察 |
肿瘤筛查 | 宫颈细胞需液基薄层制片(TBS) | 巴氏染色,异常细胞核质比分析 |
寄生虫检测 | 粪便需过滤浓缩,虫卵需透明化处理 | 卢戈氏碘液染色,阿米巴原虫观察 |
三、样品制备技术影响
固定与脱水:
电镜样品:需戊二醛固定+乙醇梯度脱水,避免细胞自溶。
免疫荧光:需多聚甲醛固定,保留抗原活性。
切片与染色:
石蜡切片:厚度4-6μm,HE染色区分细胞类型。
冰冻切片:用于酶活检测,需-20℃速冻。
特殊染色技术:
银染:显示网状纤维(如肾活检标本)。
PAS染色:检测真菌细胞壁多糖成分。
四、不达标样品的处理方案
浑浊液体:
离心+涂片:如脑脊液细胞学检查。
过滤稀释:尿液管型分析需过滤黏液丝。
脆弱样品:
低温包埋:眼球组织冷冻切片避免冰晶损伤。
树脂渗透:神经组织电镜标本需环氧树酯包埋。
磁性样品:
去磁处理:血液磁珠分选后需消磁,避免干扰物镜磁场。
五、质量控制要点
制备后验证:用低倍镜预扫确认无气泡/裂痕。
染色对照:设置阳性/阴性对照片,确保染色特异性。
记录追踪:标注样品来源、制备时间及方法。
通过严格遵循这些要求,可显著提升检验科医用显微镜的检测效率和诊断准确性。例如,规范的骨髓涂片制备能使白血病细胞识别率从65%提升至90%以上。