生物显微镜的使用小技巧之：覆盖差

生物显微镜的光学系统也包含盖玻片以内。因为盖玻片的薄厚不规范，光线从盖玻片进到家气体造成映射后的激光光路发生了更改，进而造成了象差，这就是覆盖差。覆盖差的造成危害了光学显微镜的成象品质。国际性上要求，生物显微镜中盖玻片的规范薄厚为0.17mm，容许范畴在0.16～0.20mm，在物镜的生产制造上己将此薄厚范畴的象差测算以内。物镜机壳标注刻的0.17，就是说明该物镜规定盖玻片薄厚。

因为制做技术性等缘故，生物显微镜中盖玻片薄厚很有可能在0.16下列或0.18之上，因此便会产生覆盖差。盖玻片太厚，不应该进到物镜的光线会进到物镜；盖玻片过薄，则应当进到物镜的光线却不可以进到。

生物显微镜中变大倍数愈高，NA值愈大，覆盖差愈显著，尤以盖玻片厚，覆盖差更为严重。

在生物显微镜中清除覆盖差理想化的方法，是用带校准环的物镜来调整。这类物镜常以40times干躁系物镜。旧式光学显微镜可以用更改物镜长短来调整，盖玻片过厚，能够将物镜减少；过薄，可将物镜相对变长。但它是消沉的方式，因物镜长短更改，放大率也随着更改，另外也危害成象品质。因而不适合科学研究用光学显微镜。

油浸系物镜不会有覆盖差难题，它是因为油和盖玻片的折光率都在1.52上下，因此产生匀称的光学系统。可是应用油镜时，生物显微镜中盖玻片太厚，超出了工作中间距，则没法变焦，乃至看不见图像。

有的物境上标着"-"标记，一般为高倍物镜（0.5times、0.75times、1times、2times），其NA值很低，不会受到盖玻片的危害，这类物镜能加也并不加盖玻片；有的物镜上标着"0”标记，为不可以加盖玻片的物镜，叫“无罩物镜”。

在生物显微镜中物镜数值孔径越大，容许盖玻片薄厚出现偏差的原因的范畴愈小，也表明越发低倍物镜对盖玻片薄厚的规定越严苛。