医用显微镜形成的图像要为人眼所感知,医用显微镜亮度必须有一定明暗差别,也称衬度。确切说像衬度就是像各部分强度(或光密度)相对于其平均强度(背景)的变化。医用显微镜薄样品成像时,未经散射的电子是构成背景的主要成份,而医用显微镜衬度决定于样品各部分对电子的不同散射效果。
医用显微镜中一般中低放大倍数的样品图像衬度属于振幅衬度,也称“散射吸收”衬度。只是此处“吸收”的含意不同于光学显微镜中光被物体吸收所造成的吸收衬度。显微镜中形成振幅衬度的基本因素是受样品弹性散射的电子的多少,或晶体样品引起的Bragg电子衍射束的隐现,后者也是一种弹性散射信号。正如本章开始已指出,弹性散射电子数随样品原子序数Z和质量密度Pt的增加而增加,而且它们主要分布在大散射角O> 10-Zrad的区域内。因此我们可以在显微镜物镜后焦而中插入带孔光阑,通过选择孔径大小来控制被阻挡弹性散射电子的多少,从而在显微镜图像中形成明暗有别的衬度。暗区对应于样品中的重元素或致密性厚区(高Z和大Pt值)>u亮区代表其中的轻元素或薄区(低Z和小Pt值)。请看图2-7。把光阑片阻拦电子等效为某种“吸收”,于是就有了“散射吸收”衬度之称。如果从波动角度来说,这种衬度决定于医用显微镜像上各处振幅值的差别而与相位无关,故也称振幅衬度。对于医用显微镜晶体样品来说,其衍射束的位置决定于样品的结构和取向。单晶样品的衍射电子束在显微镜后焦而中将会聚形成点状、医用显微镜离散而规则的排列。